Questão 113 do ENEM 2025 — Ciências da Natureza

O esquema representa um teste ELISA (Ensaio de Imunoabsorção Enzimática), amplamente usado no diagnóstico sorológico de infecções como a pelo HIV. Para responder, precisamos identificar qual componente vindo da amostra do paciente é o responsável por gerar o resultado positivo.

O ponto de partida é o sangue coletado, que se separa em três frações: hemácias (no fundo), uma fina camada de leucócitos e o plasma (a parte líquida no topo). É do plasma que sai o material analisado no teste. Vale lembrar que, embora o HIV infecte leucócitos (linfócitos T $CD4^+$), o diagnóstico sorológico não busca a célula infectada, e sim a resposta imune presente na fração líquida.

O funcionamento do ELISA indireto ocorre por etapas:

• Etapa 1 — antígenos fixados. O fundo do poço já vem preparado com antígenos do HIV presos à fase sólida. Eles são parte do kit (não vêm do paciente) e funcionam como 'isca'.
• Etapa 2 — adição do plasma. Coloca-se o plasma do paciente no poço. Se o paciente tiver sido infectado, seu sistema imune terá produzido anticorpos contra o HIV; esses anticorpos se ligam aos antígenos fixados no fundo. É essa ligação anticorpo–antígeno que caracteriza a presença da infecção.
• Etapa 3 — anticorpo secundário com enzima. Adiciona-se um anticorpo secundário associado a uma enzima (também um reagente do kit), que reconhece e se prende aos anticorpos humanos já capturados.
• Etapa 4 — substrato e cor. Por fim, adiciona-se um substrato. A enzima do anticorpo secundário degrada esse substrato, gerando uma reação colorida — o sinal de diagnóstico positivo.

Perceba que a cor só aparece se houver anticorpos do paciente presos na Etapa 2. Sem eles, o anticorpo secundário não fica retido e não há cor. Portanto, o elemento da amostra do paciente que garante o diagnóstico positivo é o anticorpo, e ele está no plasma.

Analisando as alternativas:

• A) Incorreta. O teste não detecta o antígeno do vírus vindo do paciente; ele usa antígenos do kit para capturar anticorpos.
• B) Incorreta. Embora o HIV infecte leucócitos, o ELISA usa a fração líquida (plasma/soro), não a camada de leucócitos.
• C) Incorreta. A enzima pertence ao anticorpo secundário, que é reagente do laboratório, e não a algo do paciente.
• D) Correta. O diagnóstico positivo decorre da detecção de anticorpos presentes no plasma do paciente.
• E) Incorreta. As hemácias não participam da reação e são separadas na coleta.